發布時間：2025-11-27 瀏覽量：0
前言
INTRODUCTION
此前我們的多篇文章闡述過衰老細胞對于機體健康的影響。它被稱為“被忽視的衰老推手”，主要是由于它雖然衰老，但并非完全停止活動，它們持續分泌大量促炎因子和蛋白酶（即衰老相關分泌表型，SASP），在組織中形成慢性炎癥環境，逐漸破壞組織穩態，導致胰島素抵抗、肌肉萎縮、器官功能衰退等典型衰老癥狀。傳統應對衰老研究面臨兩大難題：一是如何精準識別衰老細胞，二是如何安全有效清除這些細胞。而CAR-T細胞技術的出現，為解決這些難題提供了全新思路。
一項發表于《自然·衰老》題為“Prophylactic and long-lasting efficacy of senolytic CAR T cells against age-related metabolic dysfunction”的研究，這項新研究的不同之處在于，它將CAR-T免疫細胞視為一種預防和應對與衰老相關變化的方法，為抗衰老醫學開辟了全新方向
該研究團隊創新性地應用通過基因工程改造的CAR-T細胞靶向清除體內積累的衰老細胞，成功開發出靶向uPAR蛋白的CAR-T細胞，一定程度改善老年小鼠的代謝功能，甚至能在年輕時單次注射就實現長達15個月的持續保護效果。uPAR（尿激酶型纖溶酶原激活物受體）作為細胞表面標志物，在多種衰老細胞中顯著高表達。
通過對老年小鼠組織的單細胞測序分析，研究人員發現uPAR陽性細胞在肝臟、脂肪和胰腺中的比例隨年齡增長顯著升高，且與衰老特征高度重合。更重要的是，這些細胞不僅包括免疫系統的巨噬細胞，還涉及內皮細胞、前脂肪細胞等直接影響代謝的關鍵細胞類型。
雖然此項研究數據顯示CAR-T技術在動物實驗中，呈現出比較亮眼的效果，現有數據也顯示老年人血液中可溶性uPAR水平與衰老進程正相關，但組織特異性表達譜仍需完善。此外，老年個體可能存在的免疫衰老現象，可能影響CAR-T細胞的增殖效率。
隨著全球老齡化加劇，這種潛在的應對衰老策略具有一定的價值。隨著技術迭代，或許在不久的將來，定期接受抗衰老CAR-T治療將成為保持健康活力的常規醫療選擇，幫助人類突破自然壽命的極限，享受更高質量的長壽人生。
在2024年度《科學》雜志公布的十大科學突破中，CAR-T免疫細胞在自身免疫性疾病中的應用成功入圍。“Science年度十大科學突破"是由《科學》雜志每年組織評選的一項活動，旨在表彰一年中全球范圍內最引人注目的科學研究成果。
在這個科技日新月異的時代，醫學領域的每一次突破都為我們帶來了更多的希望與可能。
早在2013年CAR-T便獲選《科學》雜志評選的年度突破之一。近年來，CAR-T療法在血液腫瘤的治療中取得了顯著成效，被譽為“癌癥治療的新曙光”。
與傳統療法相比，CAR 的內在特異性是其的天然優勢，單個 CAR-T細胞還可以呈指數級擴增并殺死數百甚至數千個腫瘤靶細胞。目前，隨著CAR組件的不斷改進優化，有關CAR-T療法的臨床研究越來越多。
CAR-T細胞治療在過去的10年取得了驚人的成果，已經有多款CAR-T產品在國內外上市，目前已經上市的CAR-T細胞產品集中在CD19和BCMA 2個靶點，適應癥也集中在血液腫瘤領域。另外還有多個靶點的多個血液腫瘤領域的適應癥正在開發當中。
目前CAR-T細胞多基于自體T細胞進行制備，T細胞的數量及質量是影響CAR-T制備及后續效果的一個關鍵因素，采集困難、CAR-T制備失敗或因T細胞導致的CAR-T療效不佳等風險時有存在，因此及早凍存PBMC是良好的方案，能讓自己將來多一份應對疾病的機會。那么凍存與非凍存的PBMC制備出來的CAR-T的效果是否一致，是應當首要考慮的問題。
2022年Julieta Abraham-Miranda等人發表的研究，系統比較了新鮮與冷凍PBMC作為起始材料在生產第二代抗CD19 CAR-T細胞（分別攜帶CD28或4-1BB共刺激結構域）過程中的差異。研究發現冷凍保存的PBMC制造過程中CAR-T細胞擴增較慢，但不會影響表型。且通過新鮮或冷凍保存PBMC制造CAR-T細胞時，CAR-T細胞激活，細胞因子產生和體外抗腫瘤細胞毒性并沒有差異。這項研究提示我們PBMC的提早冷凍保存可能是解決CAR-T制備過程中T細胞來源問題的解決方案，而不會損害最終CAR-T產品的質量。
研究從30名健康供者中同時獲取新鮮和冷凍的PBMC，使用相同的病毒批次并行制備CAR-T細胞（h1928z與h19BBz），研究首先通過流式細胞術評估了冷凍保存對導入效率和CAR密度的影響。結果顯示新鮮或冷凍保存的PBMCs之間沒有觀察到導入效率和CAR密度的顯著差異。
但冷凍保存的PBMC顯著增加了擴增期間CAR-T細胞的倍增時間。與h1928 zfresh CAR-T細胞相比，h1928 zcryo中的倍增時間高1.25倍，而h19 BBzcryo中的倍增時間比h19 BBzfresh CAR-T細胞高1.5倍。
以往研究證明，CAR-T細胞的擴增、持久性和抗腫瘤活性取決于細胞表型，分化程度較低的表型CAR-T細胞療法中的功能越強，該研究中CD4/CD8比例，T細胞記憶亞群（如中央記憶型、效應記憶型）分布，新鮮組與冷凍組之間無顯著差異。這說明冷凍并未改變T細胞的基本特征。
線粒體穩態在CAR-T細胞存活和功能中起關鍵作用。線粒體生物發生和線粒體自噬的誘導對于維持線粒體健康以滿足活化的CAR-T細胞的ATP需求至關重要。研究分析了線粒體膜電位、生物量以及激活誘導的細胞凋亡水平，兩組之間保持一致，表明冷凍并未損害T細胞的代謝健康或抗凋亡能力。
冷凍未影響CAR-T與靶細胞接觸后的活化、磷酸化水平。
為了進一步比較新鮮和冷凍CAR-T細胞的效應功能，研究量化了用表達hCD 19的靶細胞體外刺激后細胞因子分泌。發現h1928z CAR-T細胞（CD28共刺激）在冷凍組中IFN-γ和TNF-α分泌顯著降低，而h19BBz組則無此現象。但體外細胞溶解實驗表明，新鮮和冷凍h1928 z和h19 BBz CAR-T細胞以相似的動力學和效率溶解靶細胞，說明兩組CAR-T細胞的體外殺傷能力并無差異。
總結來說，冷凍PBMC可作為CAR-T制備的起始材料，雖略微延長擴增時間，但不影響最終產品的表型、激活狀態、代謝健康及體外殺傷效能。
山東省齊魯細胞治療工程技術有限公司是一家以細胞技術研發、臨床研究及細胞類藥物申報為發展方向的高新技術企業。公司以干細胞和免疫細胞技術為核心支撐，主要開展細胞技術的臨床科研與轉化服務、CAR-T等免疫細胞產品、拓展成人細胞存儲業務、開發新型系列細胞衍生品。
公司現階段推出了T細胞凍存項目，以保存優質的種子細胞的理念，預留健康細胞，收獲美好未來的愿景，致力于讓更多有需求的人擁有接受CAR-T治療的機會。
【注】文章內容旨在科普細胞知識，進行學術交流分享，了解行業前沿發展動態，不構成任何應用建議。
